culture preservation

定義：用適宜方法將微生物的代謝速率降至最低，使其長(zhǎng)期存活、不被污染、不易衰退、原有生物學(xué)特性穩(wěn)定，便于以后使用的儲(chǔ)存過(guò)程。

學(xué)科：微生物學(xué)_微生物學(xué)技術(shù)

相關(guān)名詞：斜面保藏 冷凍干燥保藏法 液氮保藏 菌懸液

圖片來(lái)源：視覺(jué)中國(guó)

【延伸閱讀】

菌種保藏是指保持微生物菌株原有的各種特征和生理活性的技術(shù)，其原理是根據(jù)微生物生理生化特點(diǎn)，人為創(chuàng)造環(huán)境條件，使微生物長(zhǎng)期處于代謝不活潑、生長(zhǎng)繁殖受抑制、生命活動(dòng)處于半永久性休眠的狀態(tài)。常用的菌種保藏方法有斜面保藏法、冷凍干燥保藏法、液氮保藏法、砂土管保藏法和瓊脂穿刺保藏法等。

斜面保藏法是將菌種接種在適宜的斜面培養(yǎng)基上，待菌種生長(zhǎng)完全后，置于4℃冰箱中保藏，適用于細(xì)菌、酵母、放線菌、霉菌的短期保藏。斜面保藏法方法簡(jiǎn)單、菌種存活率高，但其缺點(diǎn)是菌株仍有一定強(qiáng)度的代謝活動(dòng)，因此保存時(shí)間不長(zhǎng)、傳代多、菌種容易變異。

冷凍干燥保藏法是用保護(hù)劑制備菌懸液，將菌懸液快速降溫凍結(jié)，再通過(guò)減壓抽真空使凍結(jié)物中的水分升華成水蒸氣排出（脫水干燥），在真空狀態(tài)下立即密封瓶口，管內(nèi)呈真空狀態(tài)，最后將密封瓶置于低溫保藏。此方法廣泛適用于細(xì)菌、酵母、霉菌孢子、放線菌孢子和病毒等的保藏，保存期可達(dá)一至數(shù)十年之久，并且存活率高、變異率低。此方法的缺點(diǎn)是步驟較多、較煩瑣。

液氮保藏法是利用液氮（-196℃）的超低溫環(huán)境來(lái)保藏微生物的方法。?微生物在低于-130℃的低溫下新陳代謝趨于停止，通過(guò)添加保護(hù)劑如甘油或二甲基亞砜可保護(hù)微生物細(xì)胞，使其在超低溫環(huán)境下保持活性。?液氮保藏法是目前保存微生物菌種最可靠的方法。

砂土管保藏法是一種適用于生長(zhǎng)孢子或芽孢的厭氧菌的保藏方法。該方法利用砂土中的水分和營(yíng)養(yǎng)成分提供菌種生長(zhǎng)的微環(huán)境，同時(shí)隔絕空氣，保持菌種的厭氧狀態(tài)。該方法操作簡(jiǎn)單，將保藏菌種接種于斜面培養(yǎng)基上，經(jīng)培養(yǎng)后制成孢子懸液，將孢子懸液滴入已滅菌的砂土管中，孢子吸附在沙子上，再將砂土管置于真空干燥器中吸干水分，密封后置于-4℃冰箱中保藏。

（延伸閱讀作者：東北師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 張帆博士）

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